瑞德旋轉蒸發儀對忽地(di)笑石蒜堿提取工(gong)藝優化的(de)實驗

復合酶(mei)(mei)(mei)法提取忽地笑石(shi)(shi)蒜堿的(de)(de)工藝優化(hua)的(de)(de)實驗，用(yong)陽離(li)(li)子交換樹(shu)脂(zhi)分(fen)(fen)離(li)(li)石(shi)(shi)蒜堿。以(yi)纖維素酶(mei)(mei)(mei)與果(guo)膠酶(mei)(mei)(mei)的(de)(de)水溶(rong)液(ye)為(wei)(wei)(wei)提取溶(rong)劑，采用(yong)L9( 34 ) 正交試驗考察(cha)了酶(mei)(mei)(mei)解pH、酶(mei)(mei)(mei)加(jia)入量、酶(mei)(mei)(mei)解時間和酶(mei)(mei)(mei)解溫度等影響因素，以(yi)石(shi)(shi)蒜堿得率為(wei)(wei)(wei)指標，得*優提取工藝為(wei)(wei)(wei):料液(ye)比1∶10，pH 4．5，酶(mei)(mei)(mei)添加(jia)量4%，酶(mei)(mei)(mei)解溫度50℃，提取時間2．0 h，石(shi)(shi)蒜堿得率為(wei)(wei)(wei)0．1750%。D-001樹(shu)脂(zhi)純化(hua)條(tiao)件(jian)為(wei)(wei)(wei):上樣液(ye)pH為(wei)(wei)(wei)2，以(yi)3BV/h流(liu)(liu)速(su)上樣，以(yi)含1 5 mol /L氨水的(de)(de)70%乙(yi)醇洗脫，流(liu)(liu)速(su)為(wei)(wei)(wei)3BV/h，利(li)用(yong)瑞德旋轉蒸(zheng)發儀RE-5002初步分(fen)(fen)離(li)(li)后(hou)石(shi)(shi)蒜堿含量為(wei)(wei)(wei)15．28%。研究結果(guo)可為(wei)(wei)(wei)石(shi)(shi)蒜堿工業化(hua)生產(chan)提供參考。

     ;   Agilent 1260**液相色譜(pu)儀；FD5-3型真空(kong)冷凍干燥機；RE-5002旋轉蒸發器(qi)；AEG-220 型萬分(fen)之一天平(ping)。

        1 實驗(yan)方(fang)法(fa)

        1．1 酶種類(lei)的(de)選擇

        以(yi)石蒜堿得率為(wei)檢測指標，以(yi)忽地笑鱗莖粉末為(wei)提取物料，以(yi)pH 4．5 的水為(wei)提取劑，在料液比( g∶mL) 為(wei)1∶10條件下，分別加入3%的纖(xian)(xian)維素(su)酶(mei)(mei)(mei)(mei)、半(ban)纖(xian)(xian)維素(su)酶(mei)(mei)(mei)(mei)、果(guo)膠(jiao)酶(mei)(mei)(mei)(mei)、纖(xian)(xian)維素(su)酶(mei)(mei)(mei)(mei)與(yu)半(ban)纖(xian)(xian)維素(su)酶(mei)(mei)(mei)(mei)復(fu)合酶(mei)(mei)(mei)(mei)、纖(xian)(xian)維素(su)酶(mei)(mei)(mei)(mei)與(yu)果(guo)膠(jiao)酶(mei)(mei)(mei)(mei)復(fu)合酶(mei)(mei)(mei)(mei)、半(ban)纖(xian)(xian)維素(su)酶(mei)(mei)(mei)(mei)與(yu)果(guo)膠(jiao)酶(mei)(mei)(mei)(mei)復(fu)合酶(mei)(mei)(mei)(mei)、纖(xian)(xian)維素(su)酶(mei)(mei)(mei)(mei)與(yu)半(ban)纖(xian)(xian)維素(su)酶(mei)(mei)(mei)(mei)及果(guo)膠(jiao)酶(mei)(mei)(mei)(mei)復(fu)合酶(mei)(mei)(mei)(mei)，50℃浸提2．0h，5000rpm 離心20min，取上(shang)清(qing)液，定容(rong)至(zhi)50mL，過(guo)0．45 μm濾膜后HPLC檢測。

        1.2 D001樹脂洗脫曲線

        D-001 陽離子樹(shu)脂對石(shi)蒜堿(jian)的(de)動(dong)態洗(xi)脫曲(qu)線。洗(xi)脫至5BV時，石(shi)蒜堿(jian)基本洗(xi)脫完(wan)全，合并0～100mL 洗(xi)脫液，用瑞(rui)德旋轉(zhuan)蒸發(fa)儀蒸發(fa)后(hou)真空冷凍干(gan)燥，經(jing)HPLC檢測，石(shi)蒜堿(jian)的(de)純(chun)度為15．28%。

        2 結(jie)論

        石蒜(suan)堿(jian)(jian)酶(mei)(mei)(mei)法提取(qu)的(de)(de)(de)(de)*優工藝條件為: 按料液比( g∶mL) 1∶10加(jia)入(ru)(ru)pH為4.5 的(de)(de)(de)(de)水(shui)作(zuo)為提取(qu)溶(rong)(rong)劑，再(zai)加(jia)入(ru)(ru)4%的(de)(de)(de)(de)纖(xian)維(wei)素酶(mei)(mei)(mei)和(he)果(guo)膠酶(mei)(mei)(mei)的(de)(de)(de)(de)復(fu)合酶(mei)(mei)(mei)，在50℃水(shui)浴提取(qu)2．0h，提取(qu)3次石蒜(suan)堿(jian)(jian)得率為0．1750%。石蒜(suan)堿(jian)(jian)得率影(ying)響(xiang)的(de)(de)(de)(de)各因素為酶(mei)(mei)(mei)解溫度＞ 酶(mei)(mei)(mei)用量(liang)＞ 酶(mei)(mei)(mei)解時間＞ 酶(mei)(mei)(mei)解pH，酶(mei)(mei)(mei)解溫度對石蒜(suan)堿(jian)(jian)得率的(de)(de)(de)(de)影(ying)響(xiang)顯(xian)著。通過對石蒜(suan)堿(jian)(jian)的(de)(de)(de)(de)分離純化研究(jiu)，確定了*佳(jia)陽離子交換(huan)樹(shu)脂分離條件: 以D-001型(xing)陽離子交換(huan)樹(shu)脂進行(xing)石蒜(suan)堿(jian)(jian)分離，以3BV/h上樣至飽(bao)和(he)，以含1. 5mol /L氨水(shui)的(de)(de)(de)(de)70%乙醇溶(rong)(rong)液3 BV/h 進行(xing)洗(xi)(xi)脫，洗(xi)(xi)脫液干燥(zao)物中石蒜(suan)堿(jian)(jian)的(de)(de)(de)(de)含量(liang)為15．28%。